Consideraciones generales
Durante el período de tiempo comprendido entre los meses de agosto y octubre, se llevó a cabo en el Bioterio de la UAI el procedimiento quirúrgico a 6 ratones.
La edad promedio de los animales fue de 8 semanas y el peso promedio fue de 22,5 g. Durante el experimento, el consumo de alimento fue similar entre los grupos estudiados y no se observaron signos de deshidratación.
La eutanasia de los ratones fue realizada luego de transcurridas 2 semanas desde la intervención.
Para una mejor organización, los ratones estudiados fueron divididos en dos grupos: sham (cirugía simulada) y OUU, dentro de estos últimos se halla el riñón con obstrucción ureteral unilateral (ROUU) y el riñón contralateral sin obstrucción ureteral unilateral (RCOUU) el cual se utilizó como control interno de los animales con cirugía.
Análisis macroscópico
Los riñones de los animales pertenecientes al grupo Sham se mostraron tal como se esperaba respecto a la bibliografía, conservando sus tamaños y formas normales (Figura 1a).
La figura 1b muestra ambos riñones pertenecientes a los animales del grupo OUU. Como se observa, el RCOUU conserva su tamaño, forma y color, similar a los riñones del grupo sham. Sin embargo, el ROUU, muestra un cambio notorio respecto al RCOUU: se vuelve más pálido y tenso a la palpación (Figura 1c). Se observó que el ROUU presenta una dilatación creciente del uréter proximal a la obstrucción y la pelvis renal. Asimismo, este riñón incrementó su diámetro longitudinal y transversal. Se evidenció pérdida de la estructura anatómica normal cuando se realiza un corte sagital (Figura 1d). Este cambio morfológico es compatible con hidronefrosis.
La eutanasia de los ratones fue realizada luego de transcurridas 2 semanas desde la intervención.
Para una mejor organización, los ratones estudiados fueron divididos en dos grupos: sham (cirugía simulada) y OUU, dentro de estos últimos se halla el riñón con obstrucción ureteral unilateral (ROUU) y el riñón contralateral sin obstrucción ureteral unilateral (RCOUU) el cual se utilizó como control interno de los animales con cirugía.
Análisis macroscópico
Los riñones de los animales pertenecientes al grupo Sham se mostraron tal como se esperaba respecto a la bibliografía, conservando sus tamaños y formas normales (Figura 1a).
La figura 1b muestra ambos riñones pertenecientes a los animales del grupo OUU. Como se observa, el RCOUU conserva su tamaño, forma y color, similar a los riñones del grupo sham. Sin embargo, el ROUU, muestra un cambio notorio respecto al RCOUU: se vuelve más pálido y tenso a la palpación (Figura 1c). Se observó que el ROUU presenta una dilatación creciente del uréter proximal a la obstrucción y la pelvis renal. Asimismo, este riñón incrementó su diámetro longitudinal y transversal. Se evidenció pérdida de la estructura anatómica normal cuando se realiza un corte sagital (Figura 1d). Este cambio morfológico es compatible con hidronefrosis.
Figura 1. Imágenes representativas del aspecto macroscópico del aparato urinario de los animales de cada grupo. a-Morfología conservada de los riñones del grupo sham. b-El ROUU presenta un tamaño considerablemente mayor que su control interno, el RCOUU. c-ROUU visiblemente más pálido y tenso luego de dos semanas de la intervención. d-Corte sagital en ROUU, evidencia hidronefrosis.
Análisis histológico
Los resultados histológicos de ambos grupos demuestran cambios que se corresponden con el procedimiento que se llevó a cabo en cada uno. Se describen a continuación en primer lugar las secciones histológicas teñidas con H-E.
Como era de esperar, en los ratones sham se observó una histoarquitectura renal normal, con corteza, médula y papila conservadas. Los glomérulos se mostraron rodeados por túbulos con luz discernible y evidente (Figura 2 y 3a). Del mismo modo, estas observaciones se evidenciaron en el RCOUU de los animales sometidos a la cirugía obstructiva (Figura 2 y 3b).
En los ROUU se destacó la presencia de hidronefrosis acompañada de ablación de la médula renal externa con atrofia tubular medular cortical asociada. En la corteza se observaron túbulos proximales dilatados, expansión intersticial y engrosamiento de la membrana basal de túbulos y glomérulos (Figura 2 y 3c). Aparentemente, se observaría un infiltrado inflamatorio, pero para confirmarlo, se requieren de otros estudios que, por razones de tiempo no pudieron concretarse.
Otra característica del grupo ROUU, y ya descripta por otros investigadores [48], es que los corpúsculos renales parecen presentarse con un tamaño menor al de los RCOUU y al de animales sham.
Figura 2. Imágenes representativas de secciones de tejido renal teñidas con H-E en ratones de ambos grupos experimentales (aumento 40x). a y b- Histología normal de riñones del grupo sham y RCOUU. c-ROUU con cambios compatibles con hidronefrosis: adelgazamiento de la corteza renal, escasas unidades glomerulares, atrofia del parénquima renal.
Figura 3. Imágenes representativas de secciones de tejido renal teñidas con H-E (aumento 100x) en ratones sham, RCOUU y ROUU. a y b-Se conserva la arquitectura glomerular y tubular en los riñones de los ratones sham y RCOUU. c-Pérdida del parénquima renal normal en ROUU, con dilatación tubular (Flecha negra) y posible infiltrado inflamatorio (flecha bordó).
Por otro lado, al analizar las tinciones de colágeno, fue posible observar que tanto los riñones del grupo de ratones sham como el RCOUU no mostraron cambios significativos en la distribución de fibras colágenas (Figura 4a y b). En los ROUU se encontró un aumento en la deposición de colágeno en el intersticio tubular renal (Figura 4c). Los ROUU reflejan la presencia de cambios patológicos de fibrosis.
Figura 4. Imágenes representativas de la deposición de colágeno en el riñón de ratones sham (a), RCOUU (b) y ROUU (c), con tinción Picrosirius Red (200x). Las fibras de colágeno teñidas se evidencian de color rojo (flechas), junto con los túbulos dilatados (*).
Análisis de los parámetros bioquímicos
La determinación de los niveles séricos de urea no reveló cambios estadísticamente significativos entre los grupos estudiados (Figura 5).
Figura 5. Niveles séricos de urea en los grupos estudiados (mg/dL). Cada barra muestra la media± error estándar (n=3 ratones por grupo).
